G-蛋白偶联受体稳定表达细胞系

 

G蛋白偶联受体（GPCR）是人类基因组中最大类的膜蛋白，具有800多种验证治疗靶点的家族，且随着技术发展，新成员名单不断增长。大约一半GPCR具有感觉功能，介导嗅觉（~400），味觉（33），光感（10）和信息素信号传导。剩余的~350个非感觉GPCR通过配体介导信号传导，配体的大小范围从小分子到肽再到大蛋白；它们是临床使用中大多数药物的靶点。美国食药监局（FDA）批准的1500多种药物，其中约40%的药物主要针对GPCR。为了支持药物研发，格宁生物（ScreeNingBio）开发一系列稳定表达细胞系，用基于细胞功能的药物筛选技术，推动药物在细胞水平的发现工作。

 

格宁生物（ScreeNingBio）的稳定表达细胞系，包括人源、小鼠和大鼠GPCR，都偶联至天然G蛋白，以获得更接近生理条件下的信号通路模式。这些GPCR产品可用于检测受体介导的第二信使信号（cAMP，IP1和钙），β-Arrestin募集，受体内化和配体结合等试验。这些测定适用于化合物功效检测和高通量筛选。

 

-   cAMP测定：基于均相TR-FRET cAMP检测，以检测Gs或Gi通路的GPCR对小分子或生物制剂结合的功能状态。

-   IP1测定：基于均相TR-FRET IP1检测，以检测Gq通路的GPCR对小分子或生物制剂结合的功能状态。

-   钙流测定：基于钙离子结合荧光染料的测定，以检测Gq通路的GPCR对配体活化或抑制的功能活性。

-   β-Arrestin募集试验：GPCR受激活后与β-Arrestin蛋白结合，利用酶联互补片段技术，用来检测配体对β-Arrestin信号通路激动活性。

-   GPCR胞内吞试验：用于测量配体对GPCR受体内化的功能活性。